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王镜岩生物化学考研复习笔记之反转录

2016-10-12 10:10:50
查字典公务员网

王镜岩生物化学是考取生化方向研究生同学们的基础教材,在前期复习中同学们应该已经将书通读一遍,由于书中内容较多,建议同学们冲刺阶段的复习,以精炼的笔记为主,下面就由查字典公务员考研带着大家复习一遍此书的重点内容。

第九章 DNA的生物合成(复制)

第二节 反转录

一、反转录概念和反转录酶

反转录(reverse transcription)是以RNA为模板,由反转录酶催化dNTP合成DNA,又称逆转录或RNA指导的DNA合成。

1970年Temin和Baltimore分别从致癌RNA病毒中发现RNA指导的DNA聚合酶。逆转录酶催化的DNA合成反应要求有模板和引物,以4种脱氧核苷三磷酸为底物,此外还需适当浓度的Mg2+和还原剂(以保护酶蛋白中的巯基),DNA链的延长方向是53。此酶是一种多功能酶,兼有3种酶的活力。①RNA指导的DNA聚合酶活力,即利用RNA为模板,在其上合成互补的DNA,形成RNA-DNA杂合分子;②核糖核酸酶H的活力,专门水解RNA-DNA杂合分子的RNA。③DNA指导的 DNA聚合酶的活力,在新合成的DNA链上合成另一条互补DNA链,形成双链DNA分子。

二、反转录过程和生物学意义

所有已知的致癌RNA病毒都含有反转录酶,又称反转录病毒。其生活周期十分复杂,最关键的是反转录过程。有10步反应,需反转录酶两次转换模板。先依RNA为模板先合成一条互补DNA(cDNA)链,形成RNA-DNA杂交体;随后核糖核酸酶(RNaseH)水解它,除去RNA得cDNA单链( 称负链DNA,记作DNA-);继而以DNA(-)为模板合成DNA(+)。

反转录的发现证明遗传信息可以从RNA到DNA,传统的中心法则得以修正,1975年二人获诺贝尔生理学与医学奖。

研究表明,反转录病毒有致癌作用,其基因组含癌基因(oncogene,onc)。正常人的细胞基因组含原癌基因(pro-onc),在胚胎发育期有明显的表达,而成年个体极少表达。当一些化学致癌物诱发这些基因表达时,细胞将发生癌症(白血病等)。1983年发现的HIV是一类反转录病毒,感染人的T淋巴细胞即杀死细胞,造成人的免疫系统损伤,引起AIDS。

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